کلونی کانتر

در آزمایشگاه های میکروبیولوژی، شمارش کلونی های رشد یافته روی محیط کشت یکی از مراحل مهم در بررسی و کنترل بار میکروبی نمونه ها است. این فرآیند در بسیاری از آزمایشگاه های صنایع غذایی، دارویی، آرایشی و بهداشتی، محیط زیست و مراکز تحقیقاتی انجام می شود و دقت آن می تواند بر نتیجه نهایی آزمون تأثیر داشته باشد.

کلونی کانتر (Colony Counter) یکی از تجهیزات آزمایشگاهی است که برای مشاهده، شمارش و ثبت تعداد کلونی های میکروبی روی پلیت های کشت به کار می رود. در ساده ترین مدل ها، دستگاه با ایجاد نور و کنتراست مناسب به اپراتور کمک می کند کلونی ها را سریع تر تشخیص دهد و تعداد آن ها را ثبت کند. در مدل های پیشرفته تر، دوربین و نرم افزار پردازش تصویر نیز وارد فرآیند می شوند و شناسایی و شمارش کلونی ها تا حد زیادی به صورت خودکار انجام می شود.

در دسته کلونی کانتر دو گروه اصلی قرار می گیرند:

• کلونی کانتر دستی
• کلونی کانتر اتومات

این دو گروه از نظر روش شمارش، میزان اتوماسیون، سرعت پردازش، نحوه ثبت داده و امکانات نرم افزاری تفاوت دارند. انتخاب میان آن ها باید بر اساس حجم نمونه، نوع محیط کشت، روش آزمایش، تعداد پلیت ها و نیاز آزمایشگاه به ثبت و مستندسازی نتایج انجام شود.

نقش کلونی کانتر در آزمایشگاه های میکروبیولوژی

در بسیاری از روش های کشت میکروبی، پس از قرار گرفتن نمونه روی محیط کشت و طی شدن زمان انکوباسیون، کلونی هایی روی سطح یا داخل محیط ایجاد می شوند. شمارش این کلونی ها می تواند برای تخمین میزان میکروارگانیسم های قابل رشد در نمونه مورد استفاده قرار گیرد.

نتیجه چنین شمارشی معمولاً با واحد CFU  یا Colony Forming Unit بیان می شود. CFU به واحدهایی اشاره دارد که تحت شرایط مشخص آزمایش توانایی تشکیل کلونی دارند و الزاماً معادل تعداد سلول های منفرد موجود در نمونه نیست.

کلونی کانتر در این مرحله به آزمایشگر کمک می کند تعداد کلونی های قابل مشاهده را با نظم و دقت بیشتری ثبت کند. در مدل های دستی، این کار همچنان توسط اپراتور انجام می شود؛ اما تجهیزات اتومات با استفاده از تصویربرداری و تحلیل دیجیتال می توانند بخش بیشتری از فرآیند را خودکار کنند.

بنابراین کلونی کانتر را باید بخشی از یک فرآیند کامل آزمایش میکروبیولوژیک دانست که در کنار آماده سازی نمونه، محیط کشت، انکوباسیون و روش شمارش مورد استفاده قرار می گیرد.

ساختار و عملکرد کلونی کانتر

ساختار دستگاه به نوع آن بستگی دارد، اما هدف اصلی ایجاد شرایط مناسب برای مشاهده و شمارش کلونی ها است.

در مدل های ساده تر، پلیت روی یک سطح مخصوص قرار می گیرد و سیستم نورپردازی باعث افزایش وضوح کلونی ها می شود. شمارنده دیجیتال نیز امکان ثبت هر کلنی را فراهم می کند.

در تجهیزات اتومات، ساختار پیچیده تر است و معمولاً شامل دوربین، سیستم نورپردازی، واحد پردازش تصویر و نرم افزار تحلیل داده می شود.

فرآیند کلی را می توان به شکل زیر در نظر گرفت:

قرارگیری پلیت → نورپردازی → تصویربرداری → تشخیص کلونی → شمارش → ثبت نتیجه

در برخی تجهیزات، کاربر می تواند پارامترهای تشخیص را برای نوع خاصی از پلیت یا محیط کشت تنظیم کند.

کیفیت هر یک از این مراحل می تواند روی نتیجه نهایی اثر بگذارد. به همین دلیل، تنها تعداد مگاپیکسل دوربین یا سرعت شمارش نباید ملاک انتخاب دستگاه باشد.

انواع کلونی کانتر

کلونی کانترها از نظر میزان دخالت اپراتور و سطح اتوماسیون به دو گروه اصلی تقسیم می شوند.

کلونی کانتر دستی

کلونی کانتر دستی برای آزمایشگاه هایی طراحی شده است که شمارش کلونی توسط اپراتور انجام می شود، اما استفاده از یک سیستم نورپردازی مناسب و شمارنده دیجیتال می تواند فرآیند را سریع تر و منظم تر کند.

در این دستگاه ها پلیت در محل مشخص قرار می گیرد و اپراتور کلونی ها را مشاهده می کند. با هر بار شناسایی یک کلنی، تعداد توسط شمارنده ثبت می شود.

برخی مدل های دستی دارای نور پس زمینه، نور جانبی، ذره بین یا قلم شمارش هستند. این امکانات می توانند مشاهده کلونی های کوچک یا کم رنگ را آسان تر کنند.

سادگی کار، کنترل مستقیم فرآیند توسط اپراتور و ساختار نسبتاً ساده از ویژگی های این گروه محسوب می شود.

کلونی کانتر اتومات

کلونی کانتر اتومات از دوربین و نرم افزار پردازش تصویر برای شناسایی و شمارش کلونی ها استفاده می کند.

در این سیستم، تصویر پلیت ثبت شده و نرم افزار نواحی مربوط به کلونی ها را از محیط کشت و پس زمینه تفکیک می کند. الگوریتم های پردازش تصویر می توانند بر اساس ویژگی هایی مانند اندازه، شکل، رنگ، شدت روشنایی و کنتراست عمل کنند.

در مدل های پیشرفته تر، سیستم می تواند کلونی های نزدیک به یکدیگر یا برخی نواحی دارای هم پوشانی را نیز تحلیل کند.

این ساختار برای آزمایشگاه هایی که تعداد زیادی پلیت بررسی می کنند یا به ثبت دیجیتال نتایج نیاز دارند، اهمیت بیشتری پیدا می کند.

تفاوت کلونی کانتر دستی و اتومات

تفاوت اصلی این دو گروه در نحوه تشخیص و ثبت کلونی است.

این تفاوت ها کلی هستند و عملکرد هر دستگاه به طراحی سخت افزار، نرم افزار، نوع نمونه و روش آزمون بستگی دارد.

نورپردازی و افزایش کنتراست

یکی از عوامل مهم در شمارش کلونی، ایجاد تصویر واضح از پلیت است. اگر اختلاف میان کلونی و محیط کشت کم باشد، تشخیص آن برای اپراتور یا سیستم تصویری دشوارتر می شود.

در مدل های دستی، نور مناسب باعث می شود کلونی ها واضح تر دیده شوند و شمارش با فشار کمتری روی چشم انجام شود.

در مدل های اتومات، نورپردازی اهمیت بیشتری دارد؛ زیرا دوربین باید تصویری با کیفیت و کنتراست مناسب در اختیار نرم افزار قرار دهد.

بسته به طراحی دستگاه، ممکن است از نور مستقیم، نور غیرمستقیم، نور پس زمینه یا نور جانبی استفاده شود. برخی سیستم ها نیز امکان تغییر شرایط نوردهی را برای انواع مختلف پلیت فراهم می کنند.

بنابراین هنگام انتخاب دستگاه باید نوع محیط های کشت مورد استفاده آزمایشگاه نیز در نظر گرفته شود.

دوربین و تصویربرداری در مدل های اتومات

در کلونی کانتر اتومات، دوربین یکی از اجزای اصلی سیستم است. دوربین باید بتواند تمام سطح پلیت را با وضوح مناسب ثبت کند.

مواردی مانند رزولوشن، کیفیت لنز، فوکوس، یکنواختی نور و میدان دید می توانند روی کیفیت تصویر تأثیر داشته باشند.

با این حال، یک دوربین با رزولوشن بالا به تنهایی تضمین کننده شمارش دقیق نیست. نرم افزار باید بتواند اطلاعات تصویر را به درستی تفسیر کند.

به همین دلیل هنگام مقایسه دستگاه ها باید مجموعه دوربین + نورپردازی + الگوریتم پردازش تصویر + نرم افزار مورد بررسی قرار گیرد.

پردازش تصویر و تشخیص کلونی

در سیستم های اتومات، تصویر پلیت به نرم افزار منتقل می شود و الگوریتم تشخیص تلاش می کند نواحی مربوط به کلونی ها را شناسایی کند.

این فرآیند می تواند شامل چند مرحله باشد:

1. دریافت تصویر پلیت
2. اصلاح یا بهینه سازی تصویر
3. تفکیک کلونی از پس زمینه
4. شناسایی نواحی قابل شمارش
5. حذف برخی عوامل مزاحم
6. تفکیک کلونی های نزدیک
7. شمارش و ثبت نتیجه

نوع الگوریتم مورد استفاده اهمیت زیادی دارد؛ زیرا ظاهر کلونی ها در تمام نمونه ها یکسان نیست.

کلونی های کوچک، کم رنگ، نامنظم یا نزدیک به یکدیگر می توانند برای سیستم تشخیص چالش ایجاد کنند. در برخی دستگاه های پیشرفته، کاربر می تواند پارامترهای پردازش تصویر را برای شرایط خاص نمونه تنظیم کند.

شمارش کلونی های نزدیک و هم پوشان

یکی از چالش های مهم در شمارش، قرار گرفتن چند کلونی در کنار یکدیگر است.

اگر فاصله بین کلونی ها کم باشد، ممکن است چند کلنی به شکل یک ناحیه متصل دیده شوند. در شمارش دستی، تشخیص مرز این کلونی ها به تجربه اپراتور وابسته است.

در سیستم اتومات نیز نرم افزار باید بتواند بر اساس شکل و ساختار ناحیه، احتمال وجود چند کلونی را بررسی کند.

این قابلیت به خصوص در پلیت هایی که تعداد کلونی ها زیاد است اهمیت دارد.

البته هیچ سیستم تصویری نباید بدون اعتبارسنجی برای تمام انواع کلونی و محیط کشت یکسان فرض شود. روش شمارش باید با نمونه واقعی آزمایشگاه بررسی و تأیید شود.

تأثیر نوع محیط کشت بر شمارش

نوع محیط کشت یکی از عوامل مؤثر بر کیفیت شمارش است.

محیط های شفاف، نیمه شفاف یا کدر می توانند پس زمینه های متفاوتی برای تصویر ایجاد کنند. همچنین رنگ و ظاهر کلونی ها ممکن است بسته به نوع میکروارگانیسم و محیط کشت متفاوت باشد.

در سیستم های اتومات، این تفاوت می تواند نیاز به تنظیم پارامترهای تشخیص داشته باشد.

به همین دلیل هنگام انتخاب کلونی کانتر باید مشخص شود دستگاه با چه انواعی از پلیت و محیط کشت مورد استفاده آزمایشگاه سازگار است.

استاندارد ISO 7218:2024  نیز در ارتباط با استفاده از کلونی کانترهای اتومات، موضوع تنظیم و بررسی عملکرد سیستم را برای انواع مختلف آگار و ماتریس ها مورد توجه قرار می دهد.

روش های کشت و شمارش

کلونی کانتر می تواند در روش های مختلف کشت میکروبی مورد استفاده قرار گیرد.

کشت سطحی

در روش کشت سطحی، نمونه روی سطح محیط آگار قرار می گیرد و پس از انکوباسیون، کلونی ها روی سطح شکل می گیرند.

این روش معمولاً شرایط مناسبی برای مشاهده و تصویربرداری ایجاد می کند.

کشت عمقی

در روش  Pour Plate، نمونه با محیط کشت ترکیب شده و کلونی ها ممکن است در بخش های مختلف محیط تشکیل شوند.

در این حالت، مشاهده کلونی های داخل محیط ممکن است نسبت به کلونی های سطحی دشوارتر باشد و نوع سیستم نوری اهمیت بیشتری پیدا کند.

کشت اسپیرال

در روش  Spiral Plating، نمونه با الگوی مشخص روی سطح پلیت توزیع می شود. برای چنین نمونه هایی، سیستم شمارش باید بتواند الگوی توزیع کلونی ها را به درستی تفسیر کند.

بنابراین روش کشت یکی از اطلاعات مهمی است که پیش از خرید دستگاه باید مشخص شود.

کلونی کانتر و شمارش  CFU

در بسیاری از آزمایش های میکروبیولوژی، نتیجه شمارش به شکل CFU/Ml  یا CFU/g  گزارش می شود.

برای رسیدن به نتیجه نهایی، تعداد کلونی های مشاهده شده باید در کنار فاکتور رقت، حجم نمونه کشت شده و روش آزمون تفسیر شود.

برای مثال، یک کلونی کانتر می تواند تعداد کلونی های موجود روی پلیت را ثبت کند، اما تبدیل این عدد به غلظت میکروبی نمونه نیازمند اطلاعات مربوط به رقت و حجم نمونه است.

بنابراین کلونی کانتر وظیفه شمارش را انجام می دهد و محاسبه نهایی باید بر اساس روش آزمایشگاهی مربوط انجام شود.

اهمیت رقت نمونه

در نمونه هایی که بار میکروبی بالایی دارند، ممکن است تعداد زیادی کلونی روی یک پلیت تشکیل شود.

اگر کلونی ها بیش از حد متراکم باشند، تفکیک آن ها دشوار شده و احتمال خطای شمارش افزایش پیدا می کند.

به همین دلیل در روش های استاندارد، نمونه ممکن است در چند مرحله رقیق شود تا پلیت هایی با تراکم مناسب برای شمارش به دست آید.

در مدل های اتومات نیز کیفیت ورودی اهمیت زیادی دارد؛ زیرا پردازش تصویر نمی تواند جایگزین انتخاب صحیح رقت و روش کشت شود.

کاربردهای کلونی کانتر

کلونی کانتر در طیف گسترده ای از آزمایشگاه های میکروبیولوژی و کنترل کیفیت کاربرد دارد.

صنایع غذایی

در صنایع غذایی، شمارش میکروبی می تواند برای بررسی مواد اولیه، محصولات در مراحل مختلف تولید و محصول نهایی مورد استفاده قرار گیرد.

در آزمایشگاه هایی که تعداد زیادی نمونه روزانه بررسی می شود، سرعت و ثبت منظم نتایج اهمیت بیشتری پیدا می کند.

صنایع دارویی

آزمایشگاه های دارویی برای برخی آزمون های میکروبیولوژیک و کنترل کیفیت محصولات و مواد اولیه به شمارش کلونی نیاز دارند.

در این محیط ها علاوه بر شمارش، قابلیت ثبت داده و مستندسازی نتایج نیز اهمیت زیادی دارد.

صنایع آرایشی و بهداشتی

بررسی آلودگی میکروبی مواد اولیه و محصولات آرایشی و بهداشتی از دیگر زمینه های کاربرد این تجهیزات است.

نوع محصول و محیط کشت می تواند روش مناسب شمارش را تعیین کند.

آزمایشگاه های محیط زیست

نمونه های آب، فاضلاب و سایر نمونه های محیطی نیز ممکن است از نظر بار میکروبی مورد بررسی قرار گیرند.

در این کاربردها، نوع نمونه و روش کشت باید در انتخاب دستگاه لحاظ شود.

مراکز تحقیقاتی و دانشگاهی

در تحقیقات میکروبیولوژی، بررسی رشد میکروارگانیسم ها و مقایسه اثر شرایط مختلف روی رشد آن ها، شمارش کلونی اهمیت زیادی دارد.

برای تعداد محدود نمونه، مدل دستی می تواند فرآیند شمارش را ساده کند و در پروژه های پرتعداد، سیستم اتومات می تواند حجم کار اپراتور را کاهش دهد.

سرعت و بهره وری در شمارش کلونی

در آزمایشگاه هایی با تعداد بالای پلیت، شمارش دستی هر پلیت می تواند زمان زیادی نیاز داشته باشد.

کلونی کانتر دستی با ایجاد نور مناسب و شمارنده دیجیتال، فرآیند را نسبت به شمارش کاملاً دستی منظم تر می کند؛ اما همچنان تشخیص هر کلونی توسط اپراتور انجام می شود.

در مدل اتومات، دوربین و نرم افزار می توانند تصویر را در مدت کوتاهی پردازش کنند. این موضوع به خصوص زمانی اهمیت دارد که تعداد زیادی پلیت با روش مشابه بررسی می شوند.

البته سرعت نباید به تنهایی معیار انتخاب باشد. دقت تشخیص، تکرارپذیری، سازگاری با محیط کشت و امکان کنترل نتیجه نیز باید هم زمان بررسی شوند.

ثبت و مدیریت نتایج

در آزمایشگاه های مدرن، ثبت نتیجه به اندازه خود شمارش اهمیت دارد.

یک کلونی کانتر می تواند بسته به مدل امکانات مختلفی برای ثبت داده ارائه دهد؛ از نمایش ساده عدد شمارش تا ذخیره تصویر و اطلاعات کامل آزمون.

قابلیت های قابل بررسی شامل موارد زیر هستند:

• ذخیره تعداد کلونی
• ذخیره تصویر پلیت
• ثبت تاریخ و زمان
• ثبت مشخصات نمونه
• ذخیره روش شمارش
• ایجاد گزارش
• خروجی گرفتن از داده ها
• انتقال اطلاعات به نرم افزارهای دیگر

در آزمایشگاه های کنترل کیفیت، چنین قابلیت هایی می توانند به کاهش خطاهای ناشی از ثبت دستی کمک کنند.

اتصال به سیستم های اطلاعات آزمایشگاهی

در آزمایشگاه هایی که از LIMS  استفاده می کنند، انتقال دیجیتال اطلاعات می تواند بخشی از گردش کاری آزمایشگاه باشد.

به عنوان مثال، اطلاعات نمونه می تواند در سیستم ثبت شود، نتیجه شمارش در دستگاه ایجاد شود و سپس داده برای ثبت نهایی به سیستم مدیریت اطلاعات منتقل شود.

این قابلیت برای همه مدل ها یکسان نیست و هنگام خرید باید سازگاری نرم افزاری و روش انتقال داده بررسی شود.

دقت، تکرارپذیری و اعتبارسنجی

دقت شمارش فقط به دستگاه وابسته نیست. شرایط کشت، تراکم کلونی، کیفیت پلیت، نورپردازی، روش آماده سازی نمونه و نحوه تفسیر نتیجه نیز می توانند تأثیرگذار باشند.

در مدل های دستی، مهارت و تمرکز اپراتور نقش مهمی دارد.

در مدل های اتومات، کیفیت الگوریتم، تنظیمات نرم افزار و توانایی سیستم در تشخیص کلونی های واقعی اهمیت بیشتری پیدا می کند.

بر اساس  ISO 7218:2024، سیستم های شمارش اتومات باید از نظر عملکرد بررسی و اعتبارسنجی شوند و کنترل های دستی نیز می توانند برای بررسی صحت عملکرد سیستم مورد استفاده قرار گیرند.

بنابراین حتی در یک کلونی کانتر اتومات، اعتبارسنجی و کنترل عملکرد دوره ای بخش مهمی از استفاده صحیح دستگاه است.

نگهداری و تمیزکاری

تمیز نگه داشتن کلونی کانتر برای حفظ عملکرد مناسب آن ضروری است.

سطح قرارگیری پلیت باید مرتباً تمیز شود و هرگونه آلودگی یا باقی مانده محیط کشت از روی آن پاک شود.

در مدل های تصویری، تمیزی سطح شیشه، لنز و مسیر تصویربرداری اهمیت بیشتری دارد. گردوغبار یا آلودگی می تواند در تصویر ثبت شده و روی تشخیص نرم افزار اثر بگذارد.

همچنین باید دستورالعمل سازنده برای نظافت، بررسی نورپردازی، دوربین و سایر اجزای دستگاه رعایت شود.

در آزمایشگاه هایی که دستگاه به صورت روزانه استفاده می شود، تعریف یک برنامه منظم نگهداری و کنترل عملکرد می تواند به حفظ کیفیت نتایج کمک کند.

عوامل مهم هنگام خرید کلونی کانتر

انتخاب کلونی کانتر باید بر اساس نوع فعالیت آزمایشگاه انجام شود.

1) حجم نمونه ها

اگر تعداد پلیت های روزانه کم باشد، یک مدل دستی ممکن است نیازهای آزمایشگاه را پوشش دهد. افزایش حجم نمونه می تواند نیاز به اتوماسیون بیشتر را ایجاد کند.

2) نوع محیط کشت

باید مشخص شود پلیت های مورد استفاده شفاف، رنگی، کدر یا دارای ویژگی های خاص هستند و دستگاه با آن ها سازگاری دارد.

3) نوع کلونی ها

اندازه، رنگ، شکل و تراکم کلونی ها می تواند روی عملکرد سیستم تأثیر بگذارد.

4) روش کشت

نوع روش کشت، مانند Surface Plate، Pour Plate یا Spiral Plating، باید پیش از انتخاب دستگاه مشخص شود.

5) نیاز به ثبت تصویر

اگر مستندسازی نتایج اهمیت دارد، قابلیت ذخیره تصویر پلیت می تواند یک معیار مهم باشد.

6) نرم افزار

امکانات پردازش تصویر، تنظیم پارامترهای شمارش، گزارش گیری و مدیریت داده باید بررسی شود.

7) اتصال به LIMS

در آزمایشگاه های مجهز به سیستم مدیریت اطلاعات، امکان انتقال داده و سازگاری نرم افزاری اهمیت پیدا می کند.

8) خدمات فنی

در مدل های اتومات، علاوه بر سخت افزار، نرم افزار و سیستم پردازش تصویر نیز نیازمند پشتیبانی هستند؛ بنابراین خدمات پس از فروش باید در فرآیند خرید در نظر گرفته شود.

انتخاب بین کلونی کانتر دستی و اتومات

انتخاب میان این دو گروه باید بر اساس حجم کاری، نوع آزمون و سطح اتوماسیون مورد نیاز انجام شود.

مدل دستی بیشتر برای آزمایشگاه هایی مناسب است که اپراتور مستقیماً فرآیند شمارش را انجام می دهد و تعداد نمونه ها در حدی است که شمارش دستی قابل مدیریت باشد.

مدل اتومات برای محیط هایی طراحی شده که نیاز به پردازش تصویری، کاهش دخالت اپراتور، ثبت دیجیتال نتایج یا بررسی تعداد بیشتری پلیت دارند.

در نتیجه پیش از خرید بهتر است تعداد پلیت های روزانه، انواع محیط کشت، نوع کلونی ها، الزامات مستندسازی و زیرساخت نرم افزاری آزمایشگاه مشخص شود.

محصولات کلونی کانتر در لاله تجهیز آزما

لاله تجهیز آزما با ارائه تجهیزات تخصصی آزمایشگاهی، کلونی کانتر دستی و اتومات را برای استفاده در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی، کنترل کیفیت، صنایع غذایی، دارویی و مراکز تحقیقاتی تأمین می‌کند. انتخاب تجهیزات متناسب با نوع کاربری، حجم فعالیت و نیازهای فنی آزمایشگاه، می‌تواند در دقت و سهولت فرآیند شمارش کلونی‌ها مؤثر باشد.

برای دریافت اطلاعات فنی، استعلام قیمت و مشاوره در انتخاب کلونی کانتر مناسب، می‌توانید از طریق صفحه [تماس با ما] با کارشناسان لاله تجهیز آزما در ارتباط باشید.

جمع بندی

کلونی کانتر یکی از تجهیزات کاربردی برای شمارش کلونی های میکروبی روی محیط های کشت است و می تواند در آزمایشگاه های میکروبیولوژی، صنایع غذایی، دارویی، آرایشی و بهداشتی، محیط زیست و مراکز تحقیقاتی مورد استفاده قرار گیرد.

این تجهیزات در دو گروه اصلی کلونی کانتر دستی و کلونی کانتر اتومات قرار می گیرند. در مدل دستی، اپراتور وظیفه مشاهده و ثبت کلونی ها را بر عهده دارد و دستگاه با فراهم کردن نور و شمارنده مناسب، این فرآیند را ساده تر می کند. در مدل اتومات، دوربین و نرم افزار پردازش تصویر بخش مهمی از فرآیند شناسایی و شمارش را انجام می دهند.

برای انتخاب دستگاه مناسب، باید عواملی مانند حجم نمونه، نوع پلیت، محیط کشت، اندازه و شکل کلونی ها، روش کشت، نیاز به ثبت تصویر، امکانات نرم افزاری و الزامات اعتبارسنجی بررسی شوند.

همچنین باید توجه داشت که کلونی کانتر تنها یکی از اجزای فرآیند آزمون میکروبیولوژیک است و کیفیت نتیجه نهایی به آماده سازی نمونه، رقت، محیط کشت و شرایط انکوباسیون نیز وابسته است.